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BalbGlyc Endo S是一种高特异性糖苷内切酶，可以特异性水解去除抗体Fc片段上的N型糖链，酶活受到高甘露糖和半聚糖的抑制。BalbGlyc Endo S加有His标签，易于从反应中去除。

mAb经BalbGlyc Endo S去糖基化（37℃,30分钟）并经FabCutter II加工为Fc和F(ab')₂非还原电泳检测结果显示，Fc片段糖基化已经去除（泳道3，右下）。

1:mAb;
2:mAb+FabCutter II;
3:mAb+FabCutter II +BalbGlyc Endo S;
M:Protein Marker


10mM sodium phosphate,150mM NaCl,pH7.4反应体系，37℃反应1小时，能将1μg的人IgG切割95%以上，所需要的酶量，定义为一个单位。


考马斯蓝染色SDS-PAGE检测纯度大于90%，无蛋白酶污染。

组分	规格
BalbGlyc Endo S	1000U
Human IgG	70μg

保存：-20℃


BalbGlyc Endo S为冻干制剂，10mM sodium phosphate,150mM NaCl pH7.4的溶液经0.2μm无菌过滤后冻干，溶解后4～8℃可存放一个月。

• 溶解前低速离心，使冻干粉末聚集于管底。
  
• 用无菌ddH2O溶解，1000U酶加入50μL无菌ddH2O，5000U酶加入250μL无菌ddH2O，配制成为酶活性为20U/μl的溶液。
  
• 低速离心，使溶液汇聚于管底。

酶切反应的最佳pH值为7.4，最佳反应温度为37℃。许多反应缓冲液的pH值处在6～8之间，建议客户针对不同的蛋白提前进行预实验，以确定最佳反应条件。BalbGlyc Endo S酶切体系缓冲液的最适pH值为6.0～8.0（如表一）。
表一：可供选择的反应缓冲液及pH：

兼容Buffers	pH
PBS	6.5-8.0
Tris Buffer	7.0-8.0
Sodium Acetate Buffer	6.5*

注^*：pH在6.0以下，需要增加酶的用量。

• 按照溶解说明将冻干粉溶解，配制成为20U/μl的溶液。
  
• 待酶切的抗体溶解在反应缓冲液里，建议浓度为0.5～10mg/mL。
  
• 按照1U酶切1μg IgG的量将酶加到反应缓冲液里，通常在中性的条件下。
  
• 37℃酶切1小时，取部分样品跑SDS-PAGE检测切割效果。

注意：可使用本品中的Human IgG抗体做为底物测试酶切效果，用70μL ddH2O配制成1mg/mL的蛋白溶解，取50μL加入1μL的酶。酶切前后取样跑SDS-PAGE。
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